PT67細(xì)胞株復(fù)蘇失敗原因分析

PT67細(xì)胞株復(fù)蘇失敗原因分析

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產(chǎn)品名稱：PT67細(xì)胞

中文名稱：小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞

種屬：小鼠

來源：逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞；雄性；NIH Swiss

培養(yǎng)條件：DMEM

生長狀態(tài)：貼壁

PT67細(xì)胞株復(fù)蘇失敗原因分析

其他細(xì)胞培養(yǎng)用液

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，除了培養(yǎng)基外，還經(jīng)常用到一些平衡鹽溶液、消化液、pH調(diào)整液等。

一、平衡鹽溶液（balanced  salt  solution,BSS）：主要是由無機(jī)鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡，保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。主要用于取材時組織塊的漂洗、細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。zui簡單的BSS是Ringer。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+、Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。Earle平衡液含有較高的NaHCO3(2.2g/L),適合于5%CO2  的培養(yǎng)條件，Hank's平衡液僅含有0.35g/L  NaHCO3，不能用于5%CO2的環(huán)境，若放入CO2培養(yǎng)相，溶液將迅速變酸，使用時應(yīng)注意。

配制溶液應(yīng)使用雙蒸水或去離子水。如果配方中含有Ca2+、Mg2+，應(yīng)當(dāng)首先溶解這些成分。配好的平衡鹽溶液可以過濾除菌或高溫滅菌。

PT67細(xì)胞株復(fù)蘇失敗原因分析

PT67    人胚胎橫紋肌瘤細(xì)胞    人    胚胎性橫紋肌肉瘤；女性    DMEM    貼壁

PT67    人Burkkit淋巴瘤細(xì)胞    人    Burkkit淋巴瘤    1640    懸浮

PT67    小鼠調(diào)節(jié)T細(xì)胞    小鼠    調(diào)節(jié)T細(xì)胞    1640    懸浮

PT67    小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞    小鼠    逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞；雄性；NIH    Swiss    DMEM    貼壁

OCI-AML4    人急性髓系白血病細(xì)胞    人    急性髓系白血病；女性    IMDM    懸浮

OCI-LY18    人彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞    人    彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤；男性    1640    懸浮

HRMC    人腎系膜細(xì)胞    人    腎；系膜細(xì)胞    DMEM    貼壁

hREC    人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞    人    視網(wǎng)膜；內(nèi)皮細(xì)胞    DMEM    貼壁

HOCF    人脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞    人    脈絡(luò)膜；成纖維細(xì)胞    DMDM    貼壁

QBI-293A    腺病毒包裝人胚腎細(xì)胞    人    胚腎；腺病毒包裝    DMDM    貼壁

OVHM    小鼠卵巢癌細(xì)胞    小鼠    卵巢癌    1640    貼壁

WEHI-3B    小鼠髓樣單核白血病細(xì)胞    小鼠    白血病；BALB/c    1640    懸浮

SGC7901    人低分化胃癌細(xì)胞    人    胃癌；女性    1640    貼壁

HSC-2    人口底癌細(xì)胞    人    口腔鱗癌；男性    DMEM    貼壁

HRCEC    人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞    人    視網(wǎng)膜微血管；內(nèi)皮細(xì)胞    DMEM    貼壁

RBMVEC    大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞    人    腦微血管；內(nèi)皮細(xì)胞    1640    貼壁

TE-13    人食管癌細(xì)胞    人    食管鱗癌；男性    DMEM    貼壁

HPAC    人胰腺癌細(xì)胞    人    胰腺癌；女性    1640    貼壁

HS766T    人胰腺癌細(xì)胞    人    胰腺癌；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；男性    1640    貼壁

HVSMC    人血管平滑肌細(xì)胞    人    血管平滑肌    DMEM    貼壁

BT20    人乳腺癌細(xì)胞    人    乳腺導(dǎo)管癌；女性    EMEM/1640    貼壁

A101D    人黑色素瘤細(xì)胞    人    黑色素瘤；男性    DMEM    貼壁

SF126    人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞    人    膠質(zhì)母細(xì)胞瘤；女性    DMEM    貼壁

CAL62    人甲狀腺癌細(xì)胞    人    未分化甲狀腺癌；女性    DMEM    貼壁

UMUC3    人膀胱癌細(xì)胞    人    膀胱癌；男性    1640    貼壁

A673    人橫紋肌瘤細(xì)胞    人    尤因肉瘤；女性    DMEM    貼壁

C518    大鼠膝關(guān)節(jié)退變軟骨細(xì)胞    大鼠    膝關(guān)節(jié)退變軟骨細(xì)胞    EMEM    貼壁

RS1    大鼠皮膚成纖維樣細(xì)胞    大鼠    皮膚；成纖維樣細(xì)胞    DMEM    貼壁

Bcap-37    人乳腺癌細(xì)胞    人    乳腺癌；女性    1640    貼壁

SPC-A-1    人肺腺癌細(xì)胞    人    肺腺癌    1640    貼壁

RAEC    大鼠主動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞    大鼠    主動脈；血管內(nèi)皮細(xì)胞    1640    貼壁

SF767    人腦瘤細(xì)胞    人    腦瘤；女性    DMEM    貼壁

RSC-364    大鼠滑膜細(xì)胞    大鼠    滑膜細(xì)胞    DMEM    貼壁

CRFK    貓腎細(xì)胞    貓    腎；自發(fā)永生；女性    1640    貼壁

NB-4    人急性早幼粒白血病細(xì)胞    人    急性早幼粒細(xì)胞白血病；女性    1640    懸浮

ME-1    人類急性髓系白血病細(xì)胞    人    急性髓系白血病；男性    IMDM    懸浮

MKN45    人低分化胃癌細(xì)胞    人    胃癌；肝轉(zhuǎn)移；女性    1640    貼壁

CESS    人急性髓系白血病細(xì)胞    人    急性髓系白血病；男性    IMDM    懸浮

J-111    人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞    人    單核細(xì)胞白血病    1640    懸浮

OCI-AML2    人急性髓系白血病細(xì)胞    人    急性髓系白血病；男性    IMDM    懸浮

NKM-1    人白血病細(xì)胞    人    急性髓系白血病；男性    1640    懸浮

NCI-H23    人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞    人    肺腺癌；男性    1640    貼壁

ROS17/2.8    大鼠成骨細(xì)胞    大鼠    骨肉瘤；ACI    9935    DMEM/F12    貼壁

GL261    小鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞    小鼠    膠質(zhì)瘤；C57BL/6    DMEM    貼壁

RCS    大鼠軟骨肉瘤細(xì)胞    大鼠    軟骨肉瘤；SD    EMEM    貼壁

RL    人彌漫大B淋巴瘤細(xì)胞    人    彌漫大B淋巴瘤；男性    1640    懸浮

DCS    人樹突狀細(xì)胞    人    樹突狀細(xì)胞    DMEM    貼壁消化液：取材進(jìn)行原代培養(yǎng)時常常需要將組織塊消化解離形成細(xì)胞懸液，傳代培養(yǎng)時也需要將貼壁細(xì)胞從瓶壁上消化下來，常用的消化液有胰酶（Trypsin）溶液和EDTA溶液，有時也用膠原酶（collagenase）溶液。

1、胰酶溶液：胰酶活性可用消化酪蛋白的能力表示，常見有1：125和1：250，即一份胰酶可消化125或250份酪蛋白。組織培養(yǎng)用胰酶溶液一般配制成0.1-0.25%濃度，配制時要用不含Ca2+    、Mg2+及血清的平衡鹽溶液（如前面的D-Hank's），因為這些物質(zhì)會對胰酶產(chǎn)生抑制作用。胰酶作用及溶解的*pH是8-9，配制胰酶溶液應(yīng)將液體調(diào)至pH8左右，充分溶解，過濾除菌。過濾后可以再調(diào)只pH7.5，也可不調(diào)。

使用細(xì)胞清洗液配制胰酶消化液：含0.5%胰酶的細(xì)胞清洗液（100ml細(xì)胞清洗液加0.5g胰酶），過濾除菌，分裝于4度保存。

2、EDTA溶液：EDTA溶液也常用來解離細(xì)胞，它的作用機(jī)制是破壞細(xì)胞間的連接。對于一些貼壁特別牢固的細(xì)胞，還可以用EDTA和胰酶的混合液進(jìn)行消化。EDTA溶液的使用濃度為0.02%，配制時應(yīng)加堿助溶，配制后可過濾除菌，也可高溫消毒滅菌。

3、膠原酶溶液：膠原酶在上皮類細(xì)胞原代培養(yǎng)時經(jīng)常使用，膠原酶作用的對象是膠原組織，因此不容易對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。膠原酶的使用濃度為0.1-0.3mg/L或200000U/L,作用的*pH為6.5。膠原酶不受Ca2+ 、Mg2+及血清的抑制，配制時可用PBS。

PT67細(xì)胞株復(fù)蘇失敗原因分析