RAW264.7細胞形態(tài)，RAW264.7細胞株操作說明

RAW264.7細胞形態(tài)，RAW264.7細胞株操作說明RAW264.7細胞形態(tài)

操作說明：

收到細胞后，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。

（一）  如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。

(二)如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱，之后翻轉培養(yǎng)瓶10-30秒，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加*培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明，收到細胞后的次傳代一般是一傳二。

注：1、觀察細胞在低倍鏡（4或5X物鏡)下進行，否則不能準確判斷細胞的傳代密度。看細胞的形態(tài)請在10X或20X物鏡下。

2、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。

3、有些細胞貼壁不牢，如發(fā)現貼壁細胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶內。

4、收到細胞后，若發(fā)現培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請及時與我們聯系。

運輸保存：

采用干冰保存運輸。收到細胞時，若干冰已經*融化，請立即將細胞復蘇培養(yǎng)；若尚留有干冰，請立即將細胞放入液氮中保存待用，請按條件貯存細

胞，切不可將細胞置于高溫環(huán)境。

注意事項

1 ）操作前要洗手，進入超凈臺后手要用 75% 酒精或 0.2% 新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。

2 ）點燃酒精燈，操作在火焰附近進行，耐熱物品要經常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時間不能太長，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過營養(yǎng)液的用具

不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。

3 ）操作動作要準確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動，增加污染機會。

4 ）不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺面上用品要布局合理。

5 ）瓶子開口后要盡量保持 45℃ 斜位。

6 ）吸溶液的吸管等不能混用 。

慧穎生物常賣細胞：

 SV40-MES-13    小鼠腎小球系膜細胞  DMEM/F12+10%FBS 貼壁    上皮細胞樣

LLC 小鼠lewis肺癌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

GL261   小鼠膠質瘤細胞  DMEM/F12+10%FBS 貼壁    上皮細胞樣

Neuro-2a    小鼠腦神經瘤細胞    MEM+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣

L929    小鼠結締組織L細胞株929克隆 MEM+10% FBS 貼壁    上皮細胞樣

MC38    小鼠結腸癌細胞  DMEM+10% FBS    懸浮+貼壁   上皮細胞樣

B16-F10 小鼠皮膚黑色素瘤細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

MEL 小鼠紅白血病細胞    RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

NCTC 1469   小鼠正常肝細胞  DMEM+10% HS 馬血清  貼壁    淋巴母細胞

STC-1   小鼠小腸內分泌細胞  DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

Hepa 1-6    小鼠肝癌細胞    DMEM+10% FBS    貼壁    上皮細胞樣

Ana-1   小鼠巨噬細胞    RPMI-1640+10% FBS   懸浮+貼壁   淋巴母細胞

Sp2/0-Ag14  小鼠骨髓瘤細胞  DMEM+10%FBS 懸浮+貼壁   淋巴母細胞

MPC-5   小鼠足細胞  DMEM+10%FBS 貼壁    上皮細胞樣

HL-1    小鼠心肌細胞    DMEM+10%FBS 貼壁    上皮細胞樣

CT26    小鼠結腸癌細胞  RPMI-1640+10% FBS   貼壁    上皮細胞樣

BAF3、BA/F3 小鼠原B細胞株  RPMI-1640+10% FBS+10ng/ml IL-3 懸浮    淋巴母細胞

BALB/3T3 clone A31  小鼠胚胎成纖維細胞  DMEM+10%FBS 貼壁    成纖維細胞

C17.2   小鼠神經干細胞  DMEM+10%FBS 貼壁    成纖維細胞

C3H/10T1/2, Clone 8 小鼠胚胎成纖維細胞  MEM+10%FBS  貼壁    成纖維細胞

RENCA   小鼠腎癌細胞    1640+10%FBS+0.1mM 非必需氨基酸+1mM 丙酮酸鈉+2mM L-谷氨酰胺+1%P/S    貼壁    上皮細胞樣

IMCD3   小鼠腎臟內髓集合管3上皮細胞    DMEM/F12+10%FBS 貼壁    上皮細胞樣

MB49    小鼠膀胱癌細胞  DMEM+10%FBS 貼壁    上皮細胞樣