RAW264.7 RAW264.7細胞形態RAW264.7

細胞名稱

Raw264.7小鼠單核巨噬細胞白血病細胞

貨號

M003

種屬

小鼠

細胞來源

ATCC/中科院/協和醫院等地引進

生長特性

貼壁 單核細胞樣

培養條件

培養基：90% DMEM  +10% FBS（推薦HAKATA優等胎牛血清 貨號：HN-FBS-50）

溫度：37℃     氣相：95%空氣，5%二氧化碳

傳代

1.用75%酒精噴灑整個培養瓶消毒，將其平躺置于培養箱中進行1-3小時的緩沖，.然后置于無菌操作臺，打開瓶口，將其中的培養液去掉，再往其中加入5-6mL新鮮培養基并置于細胞培養箱中培養，根據細胞生長狀況及培養基顏色變化對其進行換液以及傳代；

2.待細胞長滿瓶底面積70%，已有部分細胞開始堆疊時，需要對其進行傳代，傳代比例為1:3至1：6；

3傳代步驟：去掉舊培養基后，使用細胞刮將細胞刮下，再加入培養基重懸傳代?；蛉サ襞f培養基后，加入冷PBS或培養基對細胞進行吹打將其從瓶底分離。吹打次數不宜過多，以免造成細胞損傷。若懸浮細胞較多，可直接用舊培養基吹打細胞，吹打完成后吸出培養基，1000r/min離心5min，去上清后加入新鮮培養基重懸傳代。

保存

凍存條件：80%*培養基+10%FBS+10%DMSO

(備注：建議使用本公司的冷凍液（H-W-100），用4度保存的冷凍液直接重懸細胞，不能預熱后使用。)

保存條件：液氮存儲

供應限制

僅供研究之用

常見問題及解決方案

1.培養瓶有破裂，培養液有漏液：細胞極大可能會污染，所以我們會及時安排幫老師解決。

2.收到細胞后盡快更換為含 10%血清的新鮮培養基，如因特殊情況需要繼續使用原瓶培養基，請在原瓶培養基中額外添加 10%的血清（原瓶培養基的繼續使用時間長不宜超過 72 小時）

3.細胞漂浮：培養瓶不開封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。1-2小時后觀察，如細胞大部分又貼回瓶底，表明細胞活力正常，剩余漂浮的細胞可以去掉，留8-10ml培養液培養觀察，細胞生長至匯合度80%，進行消化傳代；如細胞還是不貼壁，將細胞離心收集轉到新培養瓶，原培養瓶加部分培養液繼續培養，中間注意觀察，我們的技術人員會一直跟蹤指導，直到問題解決。