定量檢測(cè)ELISA試劑盒使用注意事項(xiàng)

　　【操作程序總結(jié)】
　　
　　準(zhǔn)備試劑，樣品和標(biāo)準(zhǔn)品
　　
　　加入準(zhǔn)備好的樣品和標(biāo)準(zhǔn)品，37℃反應(yīng)30分鐘
　　
　　洗板4次，加入酶標(biāo)試劑，37℃反應(yīng)30分鐘
　　
　　洗板4次，加入顯色液A、B，37℃顯色15分鐘
　　
　　加入終止液
　　
　　15分鐘之內(nèi)讀OD值
　　
　　計(jì)算
　　
　　【檢測(cè)范圍】
　　
　　15.6-1000pg/ml
　　
　　【規(guī)格】
　　
　　96T/盒
　　
　　【貯藏】
　　
　　2-8℃，避光防潮保存。
　　
　　【有效期】
　　
　　6個(gè)月

　　【樣本要求】
　　
　　1、樣本不能含疊氮鈉（NaN3），因?yàn)榀B氮鈉（NaN3）是辣根過(guò)氧化物酶（HRP）的抑制劑。
　　
　　2、標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能立即試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
　　
　　3、樣本應(yīng)充分離心，不得有溶血及顆粒。
　　
　　【注意事項(xiàng)】
　　
　　1、實(shí)驗(yàn)嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
　　
　　2、酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
　　
　　3、建議所有的標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照都做雙份檢測(cè)，取平均值，以減小實(shí)驗(yàn)誤差。
　　
　　4、牢記樣本已經(jīng)稀釋5倍，計(jì)算結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
　　
　　5、本試劑盒定量范圍為15.6-1000pg/ml，超過(guò)此范圍，為標(biāo)準(zhǔn)曲線延伸計(jì)算所得，不做為準(zhǔn)確定量結(jié)果，請(qǐng)用特殊稀釋液稀釋后測(cè)定準(zhǔn)確結(jié)果（15.6-1000pg/ml范圍內(nèi)），乘以總稀釋倍數(shù)即為樣本zui終濃度。
　　
　　6、若顯色過(guò)淺，可適當(dāng)延長(zhǎng)底物溫育時(shí)間。
　　
　　7、為避免交叉污染，標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照每加一個(gè)就要更換一次吸頭；酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分，要懸臂加樣，不得碰到微孔；不得重復(fù)使用封板膜。
　　
　　8、試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用，不同批號(hào)的試劑不得混用。
　　
　　9、底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。