對于ELISA試劑盒選擇的一些自我理解

*，談一下如何靈活應(yīng)用ELISA這個檢測方法以及如何去挑選ELISA試劑盒。ELISA這個方法的原理，ELISA試劑盒大家都很清楚，網(wǎng)上的資料一大堆。可真正用起來的時候，有時候就有點犯糊涂，我談一下自己的理解。  ELISA試劑盒價格
1、有些客戶會用OVA（卵清蛋白）做一些哮喘，過敏性腸炎的模型，后來會檢測粘膜特異性的sIgA以及血清里面IgG，豬ELISA試劑盒IgE等指標。當客戶向我咨詢購買這幾個指標的盒子的時候，我很肯定地說這些指標的檢測要你自己特制，不會有商品化的盒子出售的。當baidu，google一下，頁面出來大量的商品化的盒子，千篇一律的說明書時候，我真的是蒙了，我懷疑自己跟不上時代了。我這里不去評論這些盒子的真假，我仍然建議做這些檢測指標的戰(zhàn)友，選擇sigma公司V級別的OVA，然后用這個來造模，自己包板摸條件，用OD值來比較抗體含量的變化。
2、對于一些小分子的檢測，比如前列腺素、糖皮質(zhì)激素的檢測，我的理解是要用競爭法ELISA去檢測，也要購買采用這個方法的盒子。一般細胞因子的檢測，都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢測，因為因子分子量比較大，一般10幾個KD左右，很容易找到兩個或者多個抗原表位。而小分子很難找到兩個不同的表位，也就決定了包被抗體和檢測抗體無法同時結(jié)合小分子并固相化。解決方案就是酶標板上包被二抗，每個孔加入一定量的酶標的小分子，然后加樣品，再加不帶標記的檢測抗體，顯色底物。樣品的目的小分子的含量越高，吸光度越低。
3、對于胰島素的檢測，我還是推薦millpore 旗下LInco公司的檢測試劑盒，不管是放免還是ELISA，據(jù)說權(quán)在他們手中。
4、NO的檢測，一般都是采用經(jīng)典的Greiss法，現(xiàn)在市場上竟然有NO ELISA試劑盒，真是徹夜未眠也搞不明白。還有做氧化應(yīng)激指標MDA的檢測，我還是推薦大家用碧云天或者進口的檢測試劑盒，而不是ELISA試劑盒。
5、我主要的客戶是醫(yī)學院校，做實驗面向的種屬主要是人，大鼠和小鼠，現(xiàn)在市面上雞、牛、馬、羊、兔各種指標的盒子都有售，真不知道這些抗體是怎么來的，。據(jù)我所了解，這些炎癥指標還是有很大種屬特異性的。
6、ELISA檢測方法簡單，靈敏度高，我個人覺得ELISA檢測血清或者培養(yǎng)上清的細胞因子、胰島素、激素等分泌型的小分子蛋白的定量檢測；病原體抗原的定性與定量；評估自己制備的血清抗體的效價等。好多客戶有個誤區(qū)，拿來一個指標就想當然地嘗試用ELISA去檢測，我還是建議多動腦，該檢測活性的檢測活性，該做western的做western。
第二 談一下上海吉泰的ELISA檢測試劑盒，廠家是上海依克賽，應(yīng)用這個公司的產(chǎn)品，很多客戶也發(fā)表了SCI文章，如果我沒有記錯的話，mouse TGF-beta1 這個盒子發(fā)表在nature immunology上面，25分多的雜志。這個廠家產(chǎn)的盒子，是我公司zui主推的盒子，給我的感覺是靈敏度不夠高，個位數(shù)pg級達不到，血清細胞因子的檢出率比較低，在估計范圍內(nèi)。可能隨著國內(nèi)研發(fā)技術(shù)的不斷改進，我想應(yīng)該會慢慢解決這個問題的。

RnD和Bender等一些的ELISA試劑盒還是很值得信賴的，也得到了市場的認可，特別是RnD的盒子，我們賣的很好，就是價格好貴，經(jīng)費不是很充裕的實驗室難消費的起。國內(nèi)的廠家，以前我讀書的時候，晶美做的很好，也受到了客戶的好評，后來聽說，因為資金鏈的問題，解散了，真是可惜。現(xiàn)在我們市場推薦給客戶的都是上海吉泰和深圳達科為的盒子，質(zhì)量在靈敏度上和RnD的盒子還是有很大差距，但是有一點是可以肯定的，盒子反映的結(jié)果是公正客觀的。禽ELISA試劑盒 白介素ELISA試劑盒 上海ELISA試劑盒還有一個缺點就是這兩個廠家可供選擇的盒子種類比較少，主要集中在炎癥細胞因子上。