ELISA試劑盒花板問題怎么解決

 　 為了避免“花板”問題的出現(xiàn)，ELISA試劑盒 降低檢測的假陽性率，獲得更理想的實驗結(jié)果，首先在選擇ELISA試劑時，應(yīng)選擇靈敏度高、豬ELISA試劑盒特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、ELISA試劑盒價格操作方便、省時的試劑。并在檢驗的過程中應(yīng)采取下列措施:（1）抽取樣本時應(yīng)抽出足夠檢驗量的血液標(biāo)本，選擇無添加劑的真空試管，禽ELISA試劑盒便于離心，得到足夠的血清。（2）血液標(biāo)本應(yīng)置于室溫下1～2h白介素ELISA試劑盒，使血液凝固收縮，上海ELISA試劑盒然后離心檢測或讓血液過夜后再檢測。這樣才能使得血液充分收縮，讓標(biāo)本中的非特異性物質(zhì)所致的假陽性率降至zui低。（3）檢測之前，加大離心轉(zhuǎn)速，盡量延長時間，使血細(xì)胞和纖維蛋白充分沉淀，讓血細(xì)胞與血清*分離。（4）加樣時不能加入紅細(xì)胞或纖維蛋白，要按照操作說明書去做，否則會影響實驗結(jié)果。（5）封板溫育時，各孔一定要封嚴(yán)，防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā)，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。（6）手工洗板時應(yīng)注意液體被濺出或孔與孔之間的液體溢出，連成整體液面后產(chǎn)生“花板”。 （7）用洗板機洗板時應(yīng)防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。（8）洗液的溫度也會影響洗板的干凈程度，尤其是冬天溫度過低時容易出現(xiàn)“花板”問題。

    在使用ELISA試劑進行血液HBsAg、HCV、HIV及梅毒等各項檢驗的過程中，經(jīng)常發(fā)現(xiàn)空白和陰性、陽性對照以及室內(nèi)質(zhì)控孔（衛(wèi)生部臨檢中心提供，HBsAg 0.5ng，1ng;HCV、HIV、梅毒均為2NCU）結(jié)果正常，而血液標(biāo)本孔的OD值卻比較高（大多數(shù)OD值≥0.070）。標(biāo)本的陽性率很高，每板除對照孔外，有時陽性高達(dá)10孔之多，而大多數(shù)真陽性標(biāo)本都出現(xiàn)弱陽性結(jié)果。這就是試驗中所說的“花板”問題。這種現(xiàn)象對檢驗結(jié)果的正常判斷造成了很大的影響。筆者在試驗中，針對這種“花板”現(xiàn)象進行了認(rèn)真的分析及判斷。
 　　1 標(biāo)本、試劑、儀器
 　　1.1 標(biāo)本 2008年1—12月無償獻血人員的血液標(biāo)本。
 　　1.2 試劑 HBsAg、HCV、HIV、梅毒試劑均為不同廠家的ELISA試劑。
 　　1.3 儀器 LD4-2型離心機，BID RAD1575型洗板機，BID RAD550酶標(biāo)儀。
 　　2 方法
 　　所有無償獻血人員的血液標(biāo)本，按照各個廠家提供的ELISA試劑說明書進行HBsAg、HCV、HIV、梅毒等檢驗項目操作。所有試劑均在有效期內(nèi)使用。
 　　3 結(jié)果
 　　所使用不同廠家的試劑偶爾會出現(xiàn)“花板”問題。
 　　4 分析
 　　在所有標(biāo)本進行檢測的過程中，豬ELISA試劑盒所用的儀器及加樣過程都處于正常狀態(tài)的情況下，步驟均按照各種試劑說明書的要求去做，ELISA試劑盒價格排除實驗所用儀器和操作步驟對實驗結(jié)果的影響外，試劑盒內(nèi)的空白、陰性和陽性對照以及室內(nèi)質(zhì)控值都很正常，白介素ELISA試劑盒只有檢測的血液標(biāo)本情況異常。根據(jù)國家和疾控中心報告陽性率的比例不應(yīng)該是很高的情況下，上海ELISA試劑盒復(fù)查后出現(xiàn)“花板”問題的標(biāo)本基本上仍是陰性。因此，禽ELISA試劑盒原因可能是在標(biāo)本的處理，特別是放置時間、離心速度和離心時間及溫度方面的問題。所以，標(biāo)本的處理就成為實驗結(jié)果的主要可疑因素。ELISA試劑盒