DC2.4 小鼠樹突狀細胞的培養(yǎng)

DC2.4 小鼠樹突狀細胞 培養(yǎng)詳細說明：

培養(yǎng)條件：

        培養(yǎng)基類型：RPMI-1640

        FBS: 10%

        抗生素：雙抗

        培養(yǎng)條件：37℃，CO2: 5%

收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài)：如果沒長滿，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。如果細胞已經(jīng)長滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

傳代方法：

1 棄去培養(yǎng)基，用不含鈣、鎂離子的PBS 洗1-2 次。

2 加1ml 0.25%的胰酶（含0.02%EDTA），讓胰酶與大部分細胞接觸后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi)，隨時觀察細胞狀態(tài)變化，待細胞大部分變圓后加*培養(yǎng)基終止消化。

3 一般沒有特殊說明，細胞一般是一傳二。

凍存方法：70% *培養(yǎng)基，20%FBS，10%DMSO，先用現(xiàn)配。

          儲存：液氮中長期保存。

注：

1 觀察細胞在低倍鏡下觀察，便于整體估計細胞密度。

2 在運輸過程中可能會導致一些貼壁不牢的細胞發(fā)生部分脫落，可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。

3 收到細胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細胞污染等，請及時拍照存檔，于一周內(nèi)與我們。