DC2.4 小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞的培養(yǎng)

DC2.4 小鼠樹(shù)突狀細(xì)胞 培養(yǎng)詳細(xì)說(shuō)明：

培養(yǎng)條件：

        培養(yǎng)基類(lèi)型：RPMI-1640

        FBS: 10%

        抗生素：雙抗

        培養(yǎng)條件：37℃，CO2: 5%

收到細(xì)胞后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)：如果沒(méi)長(zhǎng)滿，將培養(yǎng)瓶用75%酒精消毒后在超凈臺(tái)內(nèi)更換新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。如果細(xì)胞已經(jīng)長(zhǎng)滿（約80%-90%）則傳代后繼續(xù)培養(yǎng)。

傳代方法：

1 棄去培養(yǎng)基，用不含鈣、鎂離子的PBS 洗1-2 次。

2 加1ml 0.25%的胰酶（含0.02%EDTA），讓胰酶與大部分細(xì)胞接觸后放入37℃培養(yǎng)箱內(nèi)，隨時(shí)觀察細(xì)胞狀態(tài)變化，待細(xì)胞大部分變圓后加*培養(yǎng)基終止消化。

3 一般沒(méi)有特殊說(shuō)明，細(xì)胞一般是一傳二。

凍存方法：70% *培養(yǎng)基，20%FBS，10%DMSO，先用現(xiàn)配。

          儲(chǔ)存：液氮中長(zhǎng)期保存。

注：

1 觀察細(xì)胞在低倍鏡下觀察，便于整體估計(jì)細(xì)胞密度。

2 在運(yùn)輸過(guò)程中可能會(huì)導(dǎo)致一些貼壁不牢的細(xì)胞發(fā)生部分脫落，可離心吹打后重新種入瓶中培養(yǎng)。

3 收到細(xì)胞后若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、細(xì)胞污染等，請(qǐng)及時(shí)拍照存檔，于一周內(nèi)與我們。