無外泌體血清 梅約診所如何開展exosome研究

exosome如今是個熱門的話題。這種直徑約為30-150 nm的小囊泡天然存在于所有體液中，包括血液、唾液、尿液和母乳，且其蛋白、RNA和脂肪成分特異，因此，exosome有望在多種疾病的早期診斷中發揮作用。如何開展exosome的研究？我想這是大家都感興趣的。那就讓我們來看看的梅約診所（Mayo Clinic）是怎樣做的。

exosome如今是個熱門的話題。這種直徑約為30-150 nm的小囊泡天然存在于所有體液中，包括血液、唾液、尿液和母乳，且其蛋白、RNA和脂肪成分特異，因此，exosome有望在多種疾病的早期診斷中發揮作用。如何開展exosome的研究？我想這是大家都感興趣的。那就讓我們來看看的梅約診所（Mayo Clinic）是怎樣做的。

梅約診所的Gregory Gores博士主要開展肝臟疾病的基礎研究。他所感興趣的領域之一是脂毒性及其在非酒精性脂肪性肝病發展中的作用。研究小組提出假說，認為脂毒性誘導肝臟細胞釋放囊泡（exosome和小囊泡）。他們推測，這些細胞外囊泡參與了免疫細胞的招募和激活，導致肝臟炎癥。

Gores博士的小組需要測定樣品中細胞外囊泡的大小分布和數量。之前，他們使用掃描電鏡來觀察和測定顆粒大小，并通過吸光度來測定蛋白含量，但發現這種方法不大準確。于是，他們選擇了NanoSight的納米顆粒追蹤分析（NTA）技術。有了這一技術，他們能夠在分離后立即分析囊泡，并在同一天內將濃度的囊泡用于后續實驗。

在實驗過程中，他們使用的是NS300納米顆粒分析儀。此款儀器能夠測定大小在10-2000 nm的懸浮顆粒，滿足廣泛的應用需求，包括蛋白聚集、exosome和囊泡研究、藥物運輸，也特別適合以熒光量子點標記的顆粒分析。

這個款的NanoSight儀器提供了多方面的分析。它配備一個能同時放置六塊熒光濾片的機動濾光輪，并具有流變特征，可測定在0-5 cP范圍內的粘度。它還配有高靈敏度的CMOS攝像頭、溫度控制，以及激光塊的選擇。它外形小巧，占地僅為40 cm長和25 cm寬，適合那些空間有限的實驗室。

在談及NS300納米顆粒分析儀時，研究員Petra Hirsova博士談道：“能夠實時地看到、計數并測定顆粒的大小，這相對于我們使用過的其他技術已經是很大的優勢。與掃描電鏡相比，NTA制備樣品和獲得結果要更輕松、更快速。與測定囊泡總蛋白的技術相比，NTA帶來了細胞外囊泡的更評估。”

NanoSight是一家私營公司，總部設在英國。它已在范圍內出售了500多臺儀器，其客戶包括葛蘭素史克、諾華、輝瑞、寶潔、聯合利華等，以及zui的大學和研究所。截至目前，NanoSight的技術已被900多篇第三方文獻引用。在今年9月，NanoSight被思百吉集團所收購。

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