常用菌種管理和保藏方法

菌種需有專人保管，管理人員應(yīng)具有較強(qiáng)的責(zé)任心，并具有一定的微生物專業(yè)知識(shí)和技術(shù)水平。

菌種應(yīng)保存在冰箱內(nèi)，保存菌種的冰箱不得放置食品及易揮發(fā)性藥品。

按期有專人根據(jù)操作規(guī)程進(jìn)行傳代接種。

保存菌種應(yīng)定期檢查，一般每年檢查1—2次，發(fā)現(xiàn)染菌變異等現(xiàn)象時(shí)，報(bào)告科室主任研究處理。

菌種的來源、復(fù)壯、使用和鑒定等均應(yīng)做好詳細(xì)記錄。

試驗(yàn)菌種不得任意帶出菌種保存實(shí)驗(yàn)室。外單位索取菌種時(shí)，應(yīng)包裝嚴(yán)密，妥善保存。

菌種檢查和復(fù)壯

    經(jīng)過長期保藏和傳代的菌種，由于種種原因易發(fā)生衰退、變異或死亡，因此各類菌種在保藏期間必須定期檢查，發(fā)現(xiàn)變異或衰退，應(yīng)及時(shí)給予恢復(fù)。

1.定期檢查

在一定間隔時(shí)間需重新復(fù)活、分離、純化、鑒定再保藏。

檢查項(xiàng)目：菌落形態(tài)、革蘭染色、顯微鏡下菌體形態(tài)、生化特性及血清學(xué)檢查。

2. 防止菌落的衰退

控制傳代次數(shù)。

創(chuàng)造適宜的培養(yǎng)條件。

用不同類型的細(xì)胞進(jìn)行傳代。

采用有效的保藏方法。

菌種的傳代

將微生物接種至一新鮮培養(yǎng)基上/內(nèi)，每萌發(fā)一次即為一代——USP

菌種的傳代次數(shù)（自原始的菌種凍干粉起）不得超過5代——GMP/CP2005

菌種保藏

菌種保藏方法一般分四個(gè)階段

（1）挑選特征典型的純菌菌落

（2）能產(chǎn)生孢子或芽孢的微生物應(yīng)用孢子或芽孢進(jìn)行保存

（3）選擇zui適宜的方法保藏

（4）定期對(duì)保藏菌種進(jìn)行檢查

常用的保藏方法

瓊脂斜面低溫保藏法

液體石蠟覆蓋保藏法

半固體瓊脂保藏法

甘油冷凍管保藏法

保藏芽孢液

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