LS8 小鼠成釉細胞(牙釉質)培養說明

                                                                          LS8 小鼠成釉細胞(牙釉質)培養說明

產品貨號ALWS-1847

產品規格T25

細胞背景：LS8 細胞是一種小鼠成釉細胞樣細胞系，來源于瑞士韋伯斯特（CFW）小鼠的牙釉質器官的牙上皮，是由猿猴空泡病毒 40（SV40）轉化而來的細胞系，其 NCBI 分類學編號為 1891767。

細胞形態：形態：上皮細胞樣，貼壁生長（不牢固，易脫落）。

用途：僅供科研使用。

培養條件：1） 準備 DMEM（A19008）培養基；胎牛血清PRO MAX(HB-FBS-500)，10%；雙抗(H8611)，1%。

2） 培養條件： 空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養箱濕度為 70%-80%。

該細胞培養過程中貼壁不牢固容易脫落并聚團的特性，培養過程中需要注意：每次重鋪的前 12 小時盡量減少震動，需要安安靜靜的等細胞貼壁。消化過程中 PBS 潤洗后，加入 1ml 0.25%EDTA 的胰酶消化大約 1 分鐘左右，拿出培養箱震蕩，拍打瓶底和側面，幫助脫落，如有細胞團塊較大，可以通過槍頭吸取消化液輕輕的吹打的方式分散開，避免距離太近沖擊力過大對細胞產生損傷，待細胞分散成單細胞懸液后，3ml 完培終止消化，再離心重懸后鋪瓶。

貼壁細胞參考：

一.消毒靜置等細胞穩定后拍照 100X 和 200X。棄去培養上清，用 PBS 潤洗細胞 1-2 次并吸走。

二. T25 瓶加入 0.25％EDTA 胰蛋白酶 1-2ml 于培養瓶中震蕩混勻，如果屬于貼壁不牢固的細胞很容易脫落的就培養箱外面消化震蕩待脫落 90%以上終止消化，一般小于 1 分鐘以內，甚至不加胰酶有部分貼壁非常不牢固的細胞也會自然震蕩脫落。如果是貼壁牢固的細胞則置于 37℃培養箱中消化提高效率，每 40-50 秒拿出培養箱震蕩幫助細胞脫落，如脫落 90%以上則對應 3-6ml 含有 10%血清的培養基終止，以防胰酶殘留損傷細胞。如果貼壁非常牢固的細胞，脫落的比例比較低，也不超過 2 分鐘后終止消化，再加入 1ml 培養基讓細胞緩沖后再過2 分鐘進行二次消化，反復分步消化以降低單次消化時長，減少刺激，保護細胞膜。或采用刮產刮細胞的方式處理也可以?？倸w原則是達到消化目的的同時減少細胞膜受到的損傷越小越好。

三.消化完成后輕輕吹勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 3-5min，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。將細胞懸液按 1：2 的比例分到新 T25 瓶/6cm 培養皿中，添加 6-8ml 按照說明書要求配置的新的培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按 1:2 和以上比例進行，具體以實際細胞密度決定。期間多的細胞一定保存多份細胞凍存管備種。

這株細胞長勢很塊

 上述為LS8細胞實時出庫圖